NL
EN
FR
ES
PTPT
Polymerasekettingreactie (PCR)
De polymerasekettingreactie (PCR) is een technologie in de moleculaire biologie die wordt gebruikt om een enkele kopie of enkele kopieën van een stuk DNA over verschillende ordes van grootte te amplificeren, waardoor duizenden tot miljoenen kopieën van een bepaalde DNA-sequentie worden gegenereerd.
De methode is gebaseerd op thermische cycli, bestaande uit cycli van herhaalde verwarming en koeling van de reactie voor het smelten van DNA en enzymatische replicatie van het DNA. Primers (korte DNA-fragmenten) die sequenties bevatten die complementair zijn aan het doelgebied, samen met een DNA-polymerase, waarnaar de methode is vernoemd, zijn sleutelcomponenten om selectieve en herhaalde amplificatie mogelijk te maken.
Naarmate de PCR vordert, wordt het gegenereerde DNA zelf gebruikt als sjabloon voor replicatie, waardoor een kettingreactie in gang wordt gezet waarin het DNA-sjabloon exponentieel wordt geamplificeerd. PCR kan uitgebreid worden aangepast om een breed scala aan genetische manipulaties uit te voeren.
Op polymerasekettingreactie gebaseerde tests bij R.E.D. Laboratories
Beschikbare PCR's kunnen worden uitgevoerd op bloed, lichaamsvloeistoffen (hersenvocht, speeksel, vaginale uitstrijkjes, enz.), biopsieën (darm, huid, enz.), teken, enz.
Wetenschappers van RED Labs hebben een reeks op PCR gebaseerde tests ontwikkeld (zowel conventionele PCRS als realtime qPCR's) ter ondersteuning van het testen van chronische infecties. Alle geamplificeerde fragmenten worden onderworpen aan sequencing om de echte positiviteit van het monster te bevestigen (dwz om vals-positieve resultaten te vermijden).
Momenteel beschikbare PCR-tests voor bacteriële infecties zijn onder meer: Mycoplasma spp, Mycoplasma fermentans, Mycoplasma pneumoniae, Bartonella, Brucella, Coxiella, Babesia, Anaplasma, Ehrlichia, Chlamydias, Rickettsias, Midichloria mitochondrii, enz.
Momenteel beschikbare PCR-tests voor virale infecties omvatten: Herpesvirussen zoals HHV-6, HHV-7, HHV-8, Parvovirus, EBV, Cytomegalovirus, West-Nijlvirus, Coxsackie-virus.
Wetenschappers van RED Labs hebben ook een reeks realtime qPCR's ontwikkeld voor mRNA-kwantificeringen van cytokines en immuniteitsgerelateerde markers , zoals elastase, perforine, Th1/Th2 cytokinepaneel, pro-inflammatoir cytokinepaneel, enz.
PCR's worden ook gebruikt voor genotyperingstests.
